Диагноз основан на обнаружении дефицита ферментов.

Рекомендовано исследовать активность Г-6-ФДГ и пируваткиназы, затем применить изопропаноловый тест для выявления нестабильного гемоглобина.

Скрининговые тесты для выявления дефицита Г-6-ФДГ более предпочтительны для гомозиготных по Г-6-ФДГ мужчин.

Диагноз может быть затруднен во время гемолитического криза при дефиците Г-6-ФДГ А(-) вследствие того, что молодые эритроциты имеют более высокий уровень Г-6-ФДГ.

Полезным для диагностики заболевания является обследование членов семьи больного.

Необходимо проводить повторное обследование больного после уменьшения степени гемолиза.

Присутствие базофильной пунктации предполагает свинцовое отравление или дефицит пиримидин-5-нуклеотидазы.